天麻LAMP鑒定試劑盒免費代測常見問題與解決方法:

陽性對照、待測樣本均無條帶。
1)、PCR反應體系或反應條件不合適。
2）、PCR試劑保存不當失去活性。
3）、引物設計問題。
解決方法：
1）使用梯度PCR摸索PCR反應條件。
2）2× PCR Mix應保存于-20℃，使用時避免反復凍融。若使用頻繁，可在4℃短時間存放。
3）嘗試重新設計引物進行檢查。

陽性對照有目的條帶，待測樣本無條帶或條帶弱。
1、不當儲存或長期儲存引起試劑活性喪失。
2、加入組織裂解液過量。
3、樣本裂解混合液保存不當或保存時間過久，DNA基因組已經降解。
4、模板加入量不適合。
5、PCR循環數不足。
解決方法：
1、使用新鮮的試劑。
2、增大反應體系，或減少裂解液的用量。
3、裂解混合液液可在4℃保存2-3天，盡量使用新制備的裂解液混合液進行PCR。
4、在反應體系10-20%范圍內優化模板加入量。反應效性能較差時，可以降模板濃度調節到低于10%的范圍。
5、適當增加PCR的循環數，推薦在35-40循環為佳。因為模板復雜，一般PCR反應要比用純化的 DNA模板多5-10個循環為佳。

非特異性擴增

1、PCR退火溫度太低，循環數、引物濃度或模板濃度太高。
2、PCR引物錯配。
3、配制PCR反應體系時溫度太高或配制完成后放置時間太久。
解決方法：
1、增加PCR退火溫度，降低PCR循環數、引物濃度或模板濃度。
2、重新設計PCR引物。
3、PCR反應體系的配制在低溫下進行，配制完成后盡快進行PCR擴增反應。

陰性對照出現目的條帶

1、操作工具或試劑污染。
2、樣本間交叉污染。
解決方法：
1、實驗所有試劑或器材均應高壓滅菌。操作時應小心輕柔，防止將靶序列吸入加樣槍內或濺出離心管外。

2、每個取樣器只對一個樣本使用；或取完一個樣本后，將取樣器刃口浸入2%的次**鈉溶液中，反復涮洗，然后用干凈的紙巾擦干殘液。

詳見說明