大鼠表皮干細(xì)胞

大鼠表皮干細(xì)胞分離自大鼠表皮基底層組織。表皮干細(xì)胞是皮膚組織中的成體干細(xì)胞，具有高度的自我更新能力和多向分化潛能，可定向分化為角質(zhì)形成細(xì)胞、毛囊細(xì)胞等多種表皮細(xì)胞類型，是維持皮膚穩(wěn)態(tài)更新、參與皮膚損傷修復(fù)的核心種子細(xì)胞。其主要位于表皮基底層的特定區(qū)域，通過不對(duì)稱分裂產(chǎn)生一個(gè)干細(xì)胞和一個(gè)定向分化的祖細(xì)胞，確保皮膚組織的持續(xù)再生。大鼠表皮干細(xì)胞原代培養(yǎng)3天后開始貼壁，形態(tài)呈圓形或橢圓形，核大胞漿少，排列緊密；培養(yǎng)1-2周后形成克隆樣集落，集落內(nèi)細(xì)胞形態(tài)均一；傳代后細(xì)胞保持干細(xì)胞特性，增殖能力旺盛，可穩(wěn)定表達(dá)表皮干細(xì)胞特異性標(biāo)志物。該細(xì)胞是研究皮膚再生機(jī)制、表皮發(fā)育生物學(xué)、皮膚損傷修復(fù)及皮膚病發(fā)病機(jī)制的重要實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/span>

自備試劑：0.25%胰蛋白酶-EDTA

消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液

大鼠表皮干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)室采用胰蛋白酶-EDTA聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法及克隆篩選法制備該細(xì)胞，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：經(jīng)表皮干細(xì)胞特異性標(biāo)志物（CK19、p63、β1-整合素）免疫熒光鑒定，本細(xì)胞純度可達(dá)90%以上；經(jīng)檢測(cè)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等外源污染物，細(xì)胞活性達(dá)標(biāo)。