大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)分離自大鼠骨髓組織。樹突狀細(xì)胞（DC細(xì)胞）是體內(nèi)功能最強的專職抗原提呈細(xì)胞，起源于骨髓造血干細(xì)胞，具有攝取、加工和提呈抗原的核心功能，可激活初始T淋巴細(xì)胞，啟動特異性免疫應(yīng)答，在固有免疫與適應(yīng)性免疫的橋梁作用中至關(guān)重要。其廣泛分布于全身組織器官，成熟后可遷移至淋巴器官，通過表達(dá)高水平的MHC分子和共刺激分子，高效激活免疫反應(yīng)。大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞原代誘導(dǎo)培養(yǎng)5-7天后開始成熟，初始形態(tài)呈圓形或短梭形；成熟后細(xì)胞表面出現(xiàn)大量樹突狀突起，形態(tài)不規(guī)則；傳代后可穩(wěn)定維持抗原提呈功能。該細(xì)胞是研究免疫應(yīng)答啟動機制、抗原提呈過程、免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)及相關(guān)免疫性疾病、腫瘤免疫治療的核心實驗材料。

自備試劑：PBS緩沖液、完全培養(yǎng)基、Percoll分離液、0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)基：大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基（含FBS、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子、白細(xì)胞介素-4、Penicillin、Streptomycin等）

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：半貼壁生長，成熟后懸浮或輕度貼壁

細(xì)胞形態(tài)：未成熟時呈圓形、短梭形；成熟后呈不規(guī)則形，表面有大量樹突狀突起

傳代比例：1:2

傳代特性：可傳2-4代；1-2代以內(nèi)細(xì)胞抗原提呈功能最穩(wěn)定

消化液：0.25%胰蛋白酶

大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介：實驗室采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細(xì)胞，結(jié)合體外細(xì)胞因子誘導(dǎo)培養(yǎng)法制備該細(xì)胞，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測：經(jīng)樹突狀細(xì)胞特異性標(biāo)志物（CD11c、MHC-Ⅱ）免疫熒光鑒定，本細(xì)胞純度可達(dá)90%以上；經(jīng)抗原提呈實驗驗證細(xì)胞功能正常；經(jīng)檢測不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等外源污染物，細(xì)胞活性達(dá)標(biāo)。