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大鼠原代細(xì)胞

大鼠心肌成纖維細(xì)胞

文字:[大][中][小] 2026-1-18    瀏覽次數(shù):66    

大鼠心肌成纖維細(xì)胞

大鼠心肌成纖維細(xì)胞分離自心臟組織;心臟由心肌細(xì)胞和非心肌細(xì)胞組成,非心肌細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)量的約70%,其中約90%以上的非心肌細(xì)胞由心肌成纖維細(xì)胞組成,在不同物種(如小鼠、大鼠和人類)中可能略有差異。“成纖維細(xì)胞” 指一類存在于間質(zhì)中的異質(zhì)性高遷移基質(zhì)細(xì)胞,其功能和表型具有組織特異性。在心臟中,心臟成纖維細(xì)胞負(fù)責(zé)維持組織穩(wěn)態(tài)并調(diào)控細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的更新。目前尚無完全特異性的心臟成纖維細(xì)胞分子標(biāo)志物,但這類細(xì)胞通常表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子 21(TCF21)、波形蛋白(vimentin)及 CD90(或 Thy-1)。心肌成纖維細(xì)胞在生物學(xué)特性上與肝星狀細(xì)胞存在顯著共性,二者均以“靜息-激活”的功能狀態(tài)轉(zhuǎn)換為核心特征,且狀態(tài)轉(zhuǎn)換緊密關(guān)聯(lián)細(xì)胞的增殖活性與功能實(shí)現(xiàn)。當(dāng)受到應(yīng)激或損傷時(shí),成纖維細(xì)胞會(huì)失去正常表型并活化成為肌成纖維細(xì)胞。靜息心肌成纖維細(xì)胞的細(xì)胞骨架中不含 α- 平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)。與靜息成纖維細(xì)胞不同,肌成纖維細(xì)胞收縮能力強(qiáng),其細(xì)胞骨架排列特殊,含有α-SMA陽性應(yīng)力纖維 、成熟黏著斑,并會(huì)增加骨膜蛋白(periostin)和纖維狀膠原蛋白的合成。有研究表明,在模擬天然組織特性的彈性表面培養(yǎng)原代成纖維細(xì)胞有助于減輕肌成纖維細(xì)胞的活化。對(duì)于心肌組織而言,彈性模量(E)約為7 kPa的培養(yǎng)表面模擬健康組織,而E>10 kPa的表面則被視為纖維化組織。這構(gòu)成了一個(gè)顯著挑戰(zhàn),因?yàn)閭鹘y(tǒng)聚苯乙烯組織培養(yǎng)板的硬度要高得多,通常可達(dá)E=3 GPa。此外,雖然傳代原代細(xì)胞以提高培養(yǎng)群體均一性是常規(guī)操作,但傳代會(huì)進(jìn)一步驅(qū)動(dòng)肌成纖維細(xì)胞活化。原代心肌成纖維細(xì)胞在傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)中接種數(shù)小時(shí)內(nèi)就會(huì)自發(fā)呈現(xiàn)促纖維化的活化肌成纖維細(xì)胞表型。有研究表明,在低營養(yǎng)、低血清、細(xì)胞接種在低生物力學(xué)刺激的彈性基質(zhì)(而非堅(jiān)硬塑料)上,可使未傳代(P0)原代心肌成纖維細(xì)胞在體外維持超過72小時(shí),且不會(huì)顯著活化肌成纖維細(xì)胞表型,但其維持效果仍然有限。實(shí)驗(yàn)室分離的心肌成纖維細(xì)胞,經(jīng)實(shí)驗(yàn)測(cè)試,剛分離后即立刻接種在培養(yǎng)板/爬片,培養(yǎng)24 h約70-90%占比細(xì)胞表達(dá)Vimentin處于靜息態(tài)(其他處于激活態(tài)),培養(yǎng)48 h約>70%轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ顟B(tài),α-SMA表達(dá)上升。傳代操作后大部分處于激活態(tài)。該細(xì)胞鑒定為接種24 h內(nèi)靜息態(tài)時(shí)刻鑒定(Vimentin/α-SMA),細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)、運(yùn)輸后已處于激活態(tài)。


產(chǎn)品名稱

大鼠心肌成纖維細(xì)胞

英文名稱

Rat Cardiac Fibroblasts

組織來源

心臟組織

產(chǎn)品規(guī)格

5×10^5Cells/T25

種屬

大鼠

生長特性

貼壁

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

貨號(hào)

YS-01X7271


自備試劑: 0.25%胰蛋白酶  、PBS  、完全培養(yǎng)基

培養(yǎng)基: 大鼠心肌成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率: 2-3天換液一次

生長特性: 貼壁

細(xì)胞形態(tài): 成纖維細(xì)胞樣

傳代比例: 1:2

傳代特性: 可傳3代左右

消化液: 0.25%胰蛋白酶

大鼠心肌成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌成纖維細(xì)胞采用膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin/α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

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