人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

人骨髓樹突狀細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網眼中，是一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的；樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞，典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細胞大而形態不規則，表面皺褶多，亦可見少量短刺狀突，胞內細胞器豐富并可見吞噬泡，具有較強的遷移能力，伴隨有部分未完全誘導成的單核細胞，貼壁形態多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經TNFα、LPS等誘導而成，多數呈懸浮生長， 細胞呈圓形，細胞體積進一步增大，表面大量粗細不等的樹枝樣突起（高倍鏡或者電鏡下可觀察到），伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養也可能導致自發分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志，主要通過形態學、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物（MHC）以及CD80、CD86等共刺激分子，進而激活T淋巴細胞，誘導免疫應答，處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環節；未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產生免疫應答，不能激活T細胞的第二信號，可導致T細胞無能，從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。樹突狀細胞（DC細胞），imDC/mDC共同基礎鑒定指標為CD11c，陽性率>80%，其中未成熟樹突狀細胞（imDC細胞）表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低，陽性率<30%以下。成熟樹突狀細胞（mDC細胞）表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較高，陽性率>80%。依據成熟度會有波動變化。

自備試劑： 0.25%胰蛋白酶  、PBS  、完全培養基

培養基： 人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)完全培養基(含生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 半貼壁半懸浮

細胞形態： 圓形、梭形、多角形，形態多樣

傳代比例： 不傳代

傳代特性： 屬于高度分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。

方法簡介 實驗室分離的人骨髓未成熟DC細胞采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養過程添加細胞因子誘導而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的人骨髓樹突狀細胞（未成熟DC細胞）經CD11c免疫熒光鑒定、細胞形態等綜合鑒定，純度可達80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。