人筋膜成纖維細(xì)胞

人筋膜成纖維細(xì)胞分離自筋膜組織；筋膜，解剖結(jié)構(gòu)名。指肌肉的堅(jiān)韌部分。附于骨節(jié)者為筋，包于肌腱外者為膜。是聯(lián)絡(luò)關(guān)節(jié)、肌肉，主司運(yùn)動(dòng)的組織。為肝所主，并賴(lài)肝血的滋養(yǎng)。筋膜是一類(lèi)結(jié)締組織，結(jié)締組織除了筋膜還有其他表現(xiàn)的形式，如腱、韌帶、腱膜和疤痕組織。在不同的地方結(jié)締組織也有著不同的名稱(chēng)腦和脊髓周?chē)氖悄X膜；骨周?chē)枪悄ぃ恍呐K周?chē)切陌桓骨粌?nèi)表面的是腹膜；在皮下層包圍整個(gè)身體和封閉肌肉和肌群的叫筋膜。筋膜位于肌肉的表面，分為淺筋膜和深筋膜兩種。（1）淺筋膜位于皮下，又稱(chēng)皮下筋膜，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其內(nèi)含有脂肪、淺靜脈、皮神經(jīng)以及淺淋巴結(jié)和淋巴管等。脂肪的多少因身體部位、性別和營(yíng)養(yǎng)狀況不同。臨床常作的皮下注射，即將藥液注入淺筋膜內(nèi)。（2）深筋膜位于淺筋膜深面，又稱(chēng)固有筋膜，由致密結(jié)締組織構(gòu)成，遍于全身且互相連續(xù)。深筋膜包被肌或肌群、腺體、大血管和神經(jīng)等形成筋膜鞘。四肢的深筋膜。伸入肌群之間與骨相連，分隔肌群，稱(chēng)肌間隔。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，細(xì)胞呈梭形或扁的星狀，具有突起。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30 min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6 h后細(xì)胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

自備試劑： 0.25%胰蛋白酶  、PBS  、完全培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 人筋膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性： 貼壁

細(xì)胞形態(tài)： 成纖維細(xì)胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳3代左右

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人筋膜成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的人筋膜成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的人筋膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。