人胃癌組織成纖維細(xì)胞

人胃癌組織成纖維細(xì)胞分離自人胃癌旁組織或癌間質(zhì)組織。人胃癌組織成纖維細(xì)胞是胃癌微環(huán)境中的核心間質(zhì)細(xì)胞，具有獨特的表型和功能特征，區(qū)別于正常胃組織成纖維細(xì)胞。其核心功能為分泌多種細(xì)胞因子、生長因子及細(xì)胞外基質(zhì)，通過調(diào)控胃癌細(xì)胞的增殖、侵襲與遷移，促進(jìn)腫瘤血管生成，加速胃癌的生長、進(jìn)展及轉(zhuǎn)移進(jìn)程。同時，該細(xì)胞可重塑腫瘤間質(zhì)結(jié)構(gòu)，為腫瘤細(xì)胞浸潤提供物理通道，并參與構(gòu)建腫瘤免疫抑制微環(huán)境，抑制機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)。人胃癌組織成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)2-3天后開始貼壁，初始形態(tài)呈短梭形或不規(guī)則形；培養(yǎng)5-7天細(xì)胞逐漸匯合，呈長梭形，排列成旋渦狀；傳代后可穩(wěn)定維持腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞的典型形態(tài)和病理功能特征。該細(xì)胞是研究人胃癌發(fā)生發(fā)展機(jī)制、腫瘤微環(huán)境調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及抗腫瘤藥物篩選的重要實驗材料。

自備試劑：0.25%胰蛋白酶、膠原酶Ⅰ型、PBS緩沖液、完全培養(yǎng)基

培養(yǎng)基：人胃癌組織成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基（含FBS、成纖維細(xì)胞生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子β、Penicillin、Streptomycin等）

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁生長，增殖速度較快

細(xì)胞形態(tài)：長梭形、短梭形

傳代比例：1:2-1:3

傳代特性：可傳5-7代；2-4代以內(nèi)細(xì)胞病理功能特征最穩(wěn)定

消化液：0.25%胰蛋白酶

人胃癌組織成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介：實驗室采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備該細(xì)胞，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測：經(jīng)成纖維細(xì)胞特異性標(biāo)志物（波形蛋白Vimentin、α-SMA、FSP1）免疫熒光鑒定，本細(xì)胞純度可達(dá)90%以上；經(jīng)細(xì)胞因子分泌檢測驗證細(xì)胞病理功能特征；經(jīng)檢測不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等外源污染物，細(xì)胞活性達(dá)標(biāo)。