兔鼓膜上皮干細胞

兔鼓膜上皮干細胞分離自兔鼓膜上皮組織，是具有自我更新和多向分化潛能的干細胞。核心功能為自我更新維持細胞群體穩定，分化為成熟的鼓膜上皮細胞，參與鼓膜的損傷修復和再生過程；形成鼓膜上皮屏障，抵御外耳道病原體侵襲和機械性損傷，維持鼓膜的正常生理功能。功能異常與鼓膜穿孔不愈合、中耳炎、鼓膜硬化等耳部疾病密切相關。原代培養3-4天后開始貼壁，初始形態呈圓形或多邊形；傳代后細胞生長旺盛，可穩定維持干細胞的自我更新能力及分化潛能。是研究鼓膜再生機制、耳部疾病發病機制及組織工程修復材料篩選的重要實驗材料。

自備試劑：0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液、PBS緩沖液、完全培養基

培養基：兔鼓膜上皮干細胞完全培養基（含FBS、表皮生長因子、成纖維細胞生長因子、Penicillin、Streptomycin等）

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁生長

細胞形態：圓形、多邊形

傳代比例：1:2

傳代特性：可傳5-7代；2-4代以內細胞狀態最佳，功能最穩定

消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液

兔鼓膜上皮干細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。

方法簡介：實驗室采用胰蛋白酶-EDTA聯合消化法結合差速貼壁法制備該細胞，通過特定消化體系溫和分解兔鼓膜上皮組織，分離獲得單個核細胞后，利用干細胞與其他細胞貼壁速度的差異進行純化，最終獲得高純度的兔鼓膜上皮干細胞，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測：經干細胞特異性標志物（CK19、p63、SOX2）及上皮細胞標志物（CK14）免疫熒光鑒定，本細胞純度可達90%以上；經成球實驗及分化潛能檢測驗證細胞功能正常；經檢測不含有支原體、細菌、酵母和真菌等外源污染物，細胞活性達標。