?理想曲線特征?：拐點清晰、整體平滑、基線平整無上揚。

二、關鍵參數：Ct值與閾值線
?Ct值?：熒光信號達到設定閾值的循環數。?合理范圍通常為15-35?：
?Ct < 15?：模板濃度過高，建議稀釋。
?Ct > 35?：模板量過低或擴增效率差，需謹慎解讀。
?閾值線?：應設在指數增長期的中部，儀器通常可自動設定。
三、特異性驗證：熔解曲線分析
?單峰?：表明產物單一，特異性好。
?多峰?：提示存在非特異性擴增或引物二聚體。
四、重復性與對照
?復孔重復性?：同一樣本的重復孔，Ct值差異應≤0.5個循環（上限1個循環）。
?陰性對照?：不應出現擴增曲線（Ct值應為40或無信號）。
?陽性對照?：應出現典型的S型曲線。