人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

人外周血DC細(xì)胞分離自外周血，由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中首次提出外周血這一新概念。樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞，典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則，表面皺褶多，亦可見少量短刺狀突，胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡，具有較強(qiáng)的遷移能力，伴隨有部分未完全誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞，貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成，多數(shù)呈懸浮生長， 細(xì)胞呈圓形，細(xì)胞體積進(jìn)一步增大，表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起（高倍鏡或者電鏡下可觀察到），伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞。未成熟DC細(xì)胞長時(shí)間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志，主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物（MHC）以及CD80、CD86等共刺激分子，進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)；未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強(qiáng)的抗原攝取加工能力，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答，不能激活T細(xì)胞的第二信號(hào)，可導(dǎo)致T細(xì)胞無能，從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。樹突狀細(xì)胞（DC細(xì)胞），imDC/mDC共同基礎(chǔ)鑒定指標(biāo)為CD11c，陽性率>80%，其中未成熟樹突狀細(xì)胞（imDC細(xì)胞）表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低，陽性率<30%以下。成熟樹突狀細(xì)胞（mDC細(xì)胞）表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較高，陽性率>80%。依據(jù)成熟度會(huì)有波動(dòng)變化。

產(chǎn)品名稱	人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)	英文名稱	Human Peripheral Blood Maturation Dendritic Cells
組織來源	外周血	產(chǎn)品規(guī)格	5×10^5Cells/T25
種屬	人	生長特性	半貼壁
細(xì)胞形態(tài)	圓形	貨號(hào)	YS-01X8127

自備試劑： 0.25%胰蛋白酶  、PBS  、完全培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)完全培養(yǎng)基(含生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài)： 圓形、樹突狀

傳代比例： 不傳代

傳代特性： 屬于高度分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介 實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血成熟DC細(xì)胞采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血樹突狀細(xì)胞（成熟DC細(xì)胞）經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細(xì)胞形態(tài)等綜合鑒定，純度可達(dá)80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。