人小腦顆粒細胞

人小腦顆粒細胞分離自人小腦組織。小腦顆粒細胞是小腦皮層中數(shù)量最多的神經(jīng)元，作為小腦信息處理的核心功能細胞，具有接收并整合前庭、脊髓及大腦皮層傳入信號的功能，參與機體的平衡調(diào)節(jié)、運動協(xié)調(diào)及運動學(xué)習(xí)記憶過程。該細胞可分泌谷氨酸等興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，通過突觸連接形成復(fù)雜的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)，調(diào)控小腦的正常生理功能；其功能異?；驌p傷與小腦萎縮、共濟失調(diào)、帕金森病、小腦性腦癱等神經(jīng)系統(tǒng)疾病密切相關(guān)。人小腦顆粒細胞原代培養(yǎng)3-4天后開始貼壁，初始形態(tài)呈圓形，隨后逐漸伸展形成短小突起；培養(yǎng)1周左右細胞成熟，突起相互連接形成神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)；傳代后可穩(wěn)定維持神經(jīng)元的典型形態(tài)學(xué)特征和神經(jīng)遞質(zhì)分泌功能。該細胞是研究小腦生理功能調(diào)控、神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)病機制及神經(jīng)保護藥物篩選的重要實驗材料。

自備試劑：0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液、PBS緩沖液、神經(jīng)元專用完全培養(yǎng)基、多聚賴氨酸（包被培養(yǎng)瓶）
培養(yǎng)基：人小腦顆粒細胞完全培養(yǎng)基（含F(xiàn)BS、神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、Penicillin、Streptomycin等）
換液頻率：每3-4天換液一次（溫和換液，避免機械損傷）
生長特性：貼壁生長，依賴包被基質(zhì)，可形成神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)
細胞形態(tài)：圓形胞體，帶有多個細長神經(jīng)突起
傳代比例：1:2（謹慎傳代，減少細胞損傷）
傳代特性：可傳2-3代；1-2代以內(nèi)細胞功能最佳，狀態(tài)最穩(wěn)定
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液（低溫溫和消化）
人小腦顆粒細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介：實驗室采用胰蛋白酶-EDTA聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法及神經(jīng)細胞純化法制備該細胞，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測：經(jīng)神經(jīng)元特異性標(biāo)志物（NeuN、β-Ⅲ微管蛋白、MAP2）免疫熒光鑒定，本細胞純度可達90%以上；經(jīng)神經(jīng)遞質(zhì)分泌檢測驗證細胞功能正常；經(jīng)檢測不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等外源污染物，細胞活性達標(biāo)。