人口腔粘膜成纖維細(xì)胞

人口腔粘膜成纖維細(xì)胞分離自人口腔粘膜固有層組織。口腔粘膜成纖維細(xì)胞是口腔粘膜固有層的主要功能細(xì)胞，核心功能為合成和分泌膠原蛋白、彈性纖維及細(xì)胞外基質(zhì)，維持口腔粘膜的結(jié)構(gòu)完整性、彈性與機(jī)械韌性。其可分泌多種生長因子和細(xì)胞因子，調(diào)控口腔粘膜上皮細(xì)胞的增殖、分化與遷移，參與口腔粘膜損傷修復(fù)和創(chuàng)面愈合過程；同時維持口腔微環(huán)境穩(wěn)態(tài)，功能異常與口腔粘膜潰瘍、口腔粘膜纖維化、口腔癌相關(guān)纖維化等疾病密切相關(guān)。人口腔粘膜成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)2-3天后開始貼壁，初始形態(tài)呈短梭形或不規(guī)則形；培養(yǎng)5-7天細(xì)胞逐漸匯合，呈長梭形，排列成旋渦狀或放射狀；傳代后細(xì)胞生長旺盛，可穩(wěn)定維持成纖維細(xì)胞的典型形態(tài)學(xué)特征和生理功能。該細(xì)胞是研究人類口腔粘膜生理機(jī)制、口腔粘膜損傷修復(fù)、口腔疾病發(fā)病機(jī)制及口腔藥物篩選的理想實驗材料。

自備試劑：0.25%胰蛋白酶、膠原酶Ⅰ型、PBS緩沖液、完全培養(yǎng)基

培養(yǎng)基：人口腔粘膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基（含FBS、成纖維細(xì)胞生長因子、維生素C、Penicillin、Streptomycin等）

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：長梭形、短梭形

傳代比例：1:2-1:3

傳代特性：可穩(wěn)定傳代6-8代；3-5代以內(nèi)細(xì)胞狀態(tài)最佳，功能最穩(wěn)定

消化液：0.25%胰蛋白酶

人口腔粘膜成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介：實驗室采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備該細(xì)胞，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測：經(jīng)成纖維細(xì)胞特異性標(biāo)志物（波形蛋白Vimentin、FSP1）免疫熒光鑒定，本細(xì)胞純度可達(dá)90%以上；經(jīng)細(xì)胞外基質(zhì)分泌檢測驗證細(xì)胞功能正常；經(jīng)檢測不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等外源污染物，細(xì)胞活性達(dá)標(biāo)。